Bugungi kunda molekulyar diagnostika texnologiyalari misli ko'rilmagan sur'atlarda rivojlanmoqda, so'nggi ikki yil ichida sezilarli darajada katta yutuqlarga ega. Ular orasida ISTotermal stavkali texnologiyalar ixtisoslashtirilgan uskunalar uchun ehtiyojsiz kuchaytirish qobiliyatlari tufayli ko'proq e'tiborga ega bo'ldi. Chiroq, RPA va RAA kabi bir nechta taniqli isotermal kuchaytirish usullari mavjud. Biroq, bugungi kunda men isotermal stavkali stavkani - Mira bilan tanishtirmoqchiman.
Hammaning asosiy tushunchalarni izchil tushunishiga ishonch hosil qilish uchun ba'zi bir atama tushuntirishlar mavjud:
- Polimerase polimerase kuchayishi (RPA): Bu rekombinaza vositalarida vositachilik kuchaytirilishi texnologiyasi.
- rekombinaz etaladigan kuchaytirish (raA): shunga o'xshash rekombinaza vositachiligida vositachilik usulidir.
- Loop-Counter-Medice Malmal kuchaytirish (lampaning): boshqa boshqa isotermal kuchaytirish usuli.
- Ko'pincha amalga oshiradigan isotermal kuchaytirish (Mira): yangi isotermal kuchaytirish texnologiyasi.
Tez xulosa va tushuntirish:
Ko'pchilik, bu turli xil isotermal kuchaytirish usullarining qaysi biri ishonchli va barqaror ekanligini eshitish mumkin. Aslida, har bir texnologiya o'z kuchlari va cheklovlariga ega. Biroq, muvaffaqiyatli asrab olishning asosiy omillari turli xil dasturlarda ishonchli, arzon narxlar va mustahkam ishlashni rivojlantirish qobiliyatidir.
Men hozir nima bilgan narsalarga asoslanib har bir texnologiyani qisqacha tahlil qilaman:
Chiroq (amalga oshirilgan isotermal soniya):
Maydonda ko'pchilik chiroqni 2000 yilda doktor Notomi tomonidan ishlab chiqilgan, 2000 yilda doktor Notomi tomonidan yangi genni kuchaytirish usuli sifatida ishlab chiqilgan. Hozirgi vaqtda ushbu texnologiyaga egalik huquqi Yaponiyaning Eiken kimyoviy ko, LTD kompaniyasiga tegishli
Afzalliklari:
- Yuqori sezuvchanlik (2-5 an'anaviy PCR usulidan an'anaviy kattalikdagi buyruqlar).
- qisqa reaktsiya vaqti (reaktsiyalar 30-60 daqiqada to'ldirilishi mumkin).
- Klinikdan foydalanishda maxsus asboblar kerak emas (Kit rivojlanishida real vaqtda Turbayim tavsiya etilgan).
- Operatsiya qilish oson (DNK yoki RNN ni aniqlash yoki prokulyatsiyani aniqlash yoki shablonni reaktsiya naychasini aralashtirish yoki yalang'och holda kuzatib borish uchun 63 daraja).
Kamchiliklari:
- Yuqori sezgirlik aerozol ifloslanishiga olib kelishi mumkin, ammo naycha ochilib, soxta ijobiylarning yuqori xavfi yuqori bo'lganligi sababli, uni PCR laboratoriyadan tashqarida foydalanishga yaroqsiz qiladi.
- Primer dizayni qiyin, uni ba'zi kasalliklar, ayniqsa viruslar tomonidan bir nechta keng tarqalgan ketma-ketliklari bo'lganlar uchun yaroqsiz qiladi.
- uni qo'llash nisbatan cheklangan.
RPA va RAA Isotermal kuchaytirish texnologiyalari:
Bu ikki usul asosan gomoologikdir, asosiy farqi Amaldagi rekombinaz manbai bo'lgan asosiy farq.
- RPAning rekombinasi T4 bakteriofage-dan keladi.
- RaAning rekombinasi bakteriyalar yoki zamburug'lardan olinadi.
Ishlash printsipining asosiy nuqtalari:
1
2. Arstion DNK shablonini topib, ATP gidrolliz pryerni tark etish uchun rekombinaning energetikasini ta'minlaydi va DNK polimerazi yangi DNKning yangi Strandini sintez qiladi.
3
Afzalliklari:
- RPA / raA reaktsiyasi juda tez, natijada 30 daqiqada erishish mumkin.
- sezgirlik 10 nusxada / mklga yetishi mumkin.
- kuchaytirish paytida murakkab uskunalar uchun ehtiyoj yo'q.
- Prob-xomotografiya usullarini yanada rivojlantirish, ular tahririyat cheklangan yoki iqtisodiy nochor joylarda foydalanish uchun yaxshi mos keladigan natijani sezilarli darajada soddalashtiradi.
Kamchiliklari:
- RPA - bu Abbottga tegishli bo'lgan Britsx kompaniyasi tomonidan ishlab chiqilgan texnologiya, natijada yuqori xarajatlar, uzoq vaqt davomida va texnik yordam yo'q. Bu Xitoyda keng ko'lamli dastur va ommaviy ishlab chiqarishni qiyinlashtiradi.
- RaA - bu sof ichki texnologiyalar, ammo bu shovqinlarga chidamliligi va mahsulot reagentatsiyasining muvofiqligi nuqtai nazaridan barqarorlikka ega emas. Bundan tashqari, funktsional fermentlar uchun ishlab chiqarish jarayoni yaxshilanishiga muhtoj. Texnologiya bozorda besh yil davomida bo'lgan bo'lsa-da, barqarorlik va ko'p qirrali muammolar tufayli hali keng qabul qilinmagan.
- RPA va Raa ham uzunligi uzunligi 30-35 bo'lgan birinchi darajali profilaktika qilishni talab qiladi. Qisqa insterlar o'ziga xoslik, sezgirlik va kuchaytirish tezligiga ta'sir qiladi, astar dizayni qiyinlashishni amalga oshiradi.
Mira (ko'penmallik isotermal tezkor kuchaytirish):
Mira - -2019 o'rtada kiritilgan yangi isotermal stavkadir. Bu RPA va RAA uchun hola.
Mirada RPA va RaA bilan o'xshashlik bilan baham ko'radi, ammo ish printsiplari bo'yicha ferme tanlovi, o'stirish, tozalash va boshqa ishlab chiqarishni sezilarli farqlar mavjud. Bundan tashqari, MARA ishlab chiqaruvchisi orqasidagi texnik guruh, ampfuture 11 yil davomida texnologiyani mukammallashtirdi. Hozirgi kunda magistratura, maxsus rivojlanish, ilmiy loyihalar va boshqa texnik xizmatlarni rivojlantirish uchun to'liq ta'minlandi.
Afzalliklari:
1
2. Kuchli aralashuvga chidamlilik va barqarorlik. Mira reagentlari temir yo'lni tanlash va kontsentratsiya nuqtai nazaridan keng ko'lamli ishlab chiqarish jarayonlari bilan bir qatorda muzlashning qurilishi va barqarorlashishga chidamli.
3. Sozlash va ko'p qirrali. Funktsional oqsillar ishlab chiqarish va texnologiyani chuqur anglash ustidan to'liq nazorat qilinganligi sababli, MARA turli xil dasturlarga moslashishi, turli regent tizimlari va shaxsiylashtirilgan xususiylashtirish xizmatlarini taklif qilishi mumkin.
4. Xususiy patentlar. MARA 100% avtosiklanganidan beri, mahsulotni ishlab chiqishda patent buzilishi xavfi mavjud emas. Bu MARA ichki va xalqaro bozorlarda raqobatbardosh ustunlikni beradi.
5. Barqaror keng ko'lamli ishlab chiqarishga imkon beradigan to'liq ishlab chiqarish bayonnomasi tashkil etildi.
Kamchiliklari:
1. Bozor tan olish hali ham past, turli sohalardagi ma'lumotlar va ma'lumotlar va turli sohalardagi ijobiy stavkalar kabi ma'lumotlarga ega) kengroq qabul qilish uchun zarurdir.
2. Primer yoki zonali foydalanuvchilar uchun tezkor ravishda o'tishni osonlashtiradigan astar yoki zond ketma-ketligini talab qiladigan RPA yoki RAAning premer xususiyatlariga amal qiladi.